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畢赤酵母細(xì)胞壁破碎重組膠原蛋白提取用超高速剪切均質(zhì)機(jī)钩述,畢赤酵母細(xì)胞壁破碎高速均質(zhì)機(jī),畢赤酵母細(xì)胞壁破碎高剪切均質(zhì)機(jī)穆碎,細(xì)胞混合液管線式均質(zhì)機(jī)牙勘,重組類人膠原均質(zhì)機(jī),重組人膠原蛋白均質(zhì)機(jī),重組人源化膠原蛋白均質(zhì)機(jī)方面,畢赤酵母細(xì)胞壁破碎設(shè)備放钦、技術(shù)、工藝
畢赤酵母細(xì)胞的表達(dá)產(chǎn)物的方式有胞內(nèi)表達(dá)和分泌到胞外的分泌型表達(dá)表達(dá)這兩種恭金,而表達(dá)產(chǎn)物的方式主要取決于表達(dá)載體的選擇和表達(dá)載體構(gòu)建過程中是否帶有信號肽操禀,可以根據(jù)基因表達(dá)的定位及目的選擇合適的酵母蛋白表達(dá)載體。分泌型表達(dá)的優(yōu)點(diǎn)是簡化了后續(xù)純化過程,產(chǎn)生具有天然生物活性的真核蛋白產(chǎn)物,無需復(fù)性横腿,但其缺點(diǎn)是受外界培養(yǎng)條件影響較大,對培養(yǎng)條件有較為嚴(yán)格的要求颓屑。胞內(nèi)表達(dá)的優(yōu)點(diǎn)是表達(dá)量高,糖基化程度很低或無糖基化,由于是在胞內(nèi)進(jìn)行表達(dá),因此對培養(yǎng)基及發(fā)酵條件要求不高,不易造成蛋白質(zhì)的降解,并且胞內(nèi)表達(dá)的重組蛋白具有良好的活性和生物安全性,更容易實(shí)現(xiàn)高密度發(fā)酵表達(dá)目的蛋白等蔑水,尤其是針對需要表達(dá)且不會過糖基化且有生物活性的異源蛋白邢锯,采用胞內(nèi)表達(dá)更為合適。
但是胞內(nèi)表達(dá)需要對細(xì)胞進(jìn)行破碎搀别,才可以收集產(chǎn)物丹擎,而由于畢赤酵母細(xì)胞的細(xì)胞壁按結(jié)構(gòu)劃分可分為3層,內(nèi)層為葡聚糖層歇父,中間層主要由蛋白質(zhì)組成蒂培,外層為甘露聚糖層,層與層之間可部分鑲嵌榜苫,以化學(xué)成分的占比進(jìn)行劃分护戳,甘露聚糖約占酵母細(xì)胞壁干重的30%,β-葡聚糖約占30%垂睬,糖蛋白和幾丁質(zhì)約占20%媳荒,蛋白質(zhì)、類脂驹饺、無機(jī)鹽等其他成分約占20%钳枕,內(nèi)層的β-葡聚糖屬結(jié)構(gòu)多糖,與原生質(zhì)體膜相連接赏壹,構(gòu)成了酵母細(xì)胞壁的主要成分鱼炒,功能是支撐外部甘露聚糖,而β-葡聚糖在氫鍵作用下構(gòu)成一個三維的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)蝌借,在正常滲透壓下可大量延伸昔瞧。
目針對畢赤酵母細(xì)胞的細(xì)胞壁的破碎方法根據(jù)是否存在外加作用力,分為兩種:機(jī)械法(包括超聲破碎法菩佑、磁珠法自晰、高剪切均質(zhì)化法等)和非機(jī)械法(包括酶解法、反復(fù)凍融法擎鸠、自溶法缀磕、堿法等),目常用的方法有酶解法及高剪切均質(zhì)化法,但是酶解法的破壁率在較高水平是需要控制酶含量較高袜蚕,會影響終胞內(nèi)表達(dá)的蛋白的純度糟把,而高剪切均質(zhì)化法則主要采用超高速剪切力進(jìn)行破壁,破壁效率高達(dá)95%以上牲剃∏卜瑁可以在保證產(chǎn)品純度的條件下有效的提高畢赤酵母細(xì)胞的破壁效率。
高速高剪切均質(zhì)機(jī)凿傅,主要用于微乳液及超細(xì)懸浮液的生產(chǎn)缠犀。由于工作腔體內(nèi)三組均質(zhì)頭(定子+轉(zhuǎn)子)同時工作,酵母細(xì)胞混合液經(jīng)過超高剪切后聪舒,破壁效率高達(dá)95%以上辨液。可以在保證產(chǎn)品純度的條件下有效的提高畢赤酵母細(xì)胞的破壁效率箱残。 三組均質(zhì)頭均易于更換滔迈,適合不同的工藝應(yīng)用。該系列中不同型號的機(jī)器都有相同的線速度和剪切率被辑,非常易于擴(kuò)大規(guī)牧呛罚化生產(chǎn)。
影響細(xì)胞的破壁效率的因素有以下幾點(diǎn):
1 均質(zhì)機(jī)的形式(批次式和連續(xù)式)(連續(xù)式比批次好)
2 均質(zhì)頭的剪切速率 (越大盼理,效果越好)
3 均質(zhì)頭的齒形結(jié)構(gòu)(分為初齒谈山,中齒,細(xì)齒宏怔,超細(xì)齒奏路,越細(xì)齒效果越好)
4 物料在均質(zhì)腔體的停留時間,均質(zhì)時間(可以看作同等的電機(jī)臊诊,流量越小思劳,效果越好)
5 循環(huán)次數(shù)(越多,效果越好妨猩,到設(shè)備的期限,就不能再好)
IKN模塊化設(shè)計的主要特點(diǎn)如下:
-直立式腔體結(jié)構(gòu)秽褒,物料可以全部進(jìn)入均質(zhì)腔壶硅;
-無死角;
-良好的表面處理销斟;
-符合CIP/SIP的清洗要求庐椒;
-低噪音;
-所有接觸物料的材質(zhì)均為SS316蚂踊;
-小試约谈、中試到量產(chǎn),平穩(wěn)過渡;
-僅需簡單的更換功能模塊棱诱,即可滿足分散-懸浮-均質(zhì)-乳化的不同要求泼橘;
-衛(wèi)生設(shè)計,適合食品及制藥行業(yè)迈勋;
-可提供特殊材質(zhì)滿足磨損性及腐蝕性產(chǎn)品處理要求炬灭。
ERS2000系列高速高剪切均質(zhì)機(jī)參數(shù)選型表:
高速高剪切均質(zhì)機(jī) | 標(biāo)準(zhǔn)流量 L/H | 輸出轉(zhuǎn)速 rpm | 標(biāo)準(zhǔn)線速度 m/s | 馬達(dá)功率 KW | 進(jìn)口尺寸 | 出口尺寸 |
ERS 2000/4 | 300~1,000 | 14,000 | 44 | 4 | DN25 | DN15 |
ERS 2000/5 | 1,000~1,500 | 10,500 | 44 | 11 | DN40 | DN32 |
ERS 2000/10 | 3,000 | 7,300 | 44 | 30 | DN50 | DN50 |
ERS 2000/20 | 8,000 | 4,900 | 44 | 45 | DN80 | DN65 |
ERS 2000/30 | 20,000 | 2,850 | 44 | 75 | DN150 | DN125 |
ERS 2000/50 | 40,000 | 2,000 | 44 | 160 | DN200 | DN150 |
表中上限處理量是指介質(zhì)為“水”的測定數(shù)據(jù)。
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更新時間:2024/9/18 16:31:45
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